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学习日记2:印迹法---从基因文库中“钓”目的基因  

2013-06-22 16:17:20|  分类: My边教边学 |  标签: |举报 |字号 订阅

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1、印迹法的主要步骤:

1)基因文库- DNA 用限制性内切酶处理。

2DNA 片断混合物通过电泳分离。
3)电泳后,通过印迹技术转到酯酰纤维薄膜上,以便操作。

4)用已知小片断DNA 作为探针,互补结合需要找的基因片断。

5)探针DNA 片断已用放射性元素标记,使胶片感光后可看出。

2、印迹法的原理:

关键是“分子杂交”,利用碱基配对的原则,用一段小的已知的DNA片断(探针)去寻“钓”大的未知的基因片断(目的基因)。

3、探针DNA片断的制作:

根据目的基因表达产生的目的蛋白的氨基酸序列,只要其中 N-端1520个氨基酸序列,按三联密码转为 40-60核苷酸序列,人工合成,即为探针DNA片断。

 

(注:安徽省2013生物命题之重要背景。)

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